【作者】劉建雨 張美彥 張丹 徐珍 宋春艷 李巧珍 尚曉冬 譚琦 黃志勇 胡衛(wèi)紅 張引芳 趙靜 王瑞娟

【機構】上海市農(nóng)業(yè)科學院食用菌研究所 農(nóng)業(yè)部應用真菌資源與利用重點開放實驗室國家食用菌工程技術研究中心上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點實驗室 上海雪榕生物科技股份有限公司 上海光明森源生物科技有限公司

摘要：以不完全酶解的金針菇(Flammulina velutipes)菌絲碎片作為轉(zhuǎn)化受體,通過電擊轉(zhuǎn)化法將載體pYN6981導入金針菇單核體Dan3基因組中。結果顯示:在復篩培養(yǎng)基上生長良好的轉(zhuǎn)化子,其基因組中可擴增出潮霉素基因片段,通過激光共聚焦顯微鏡可觀察到綠色熒光,GUS組織染色顯示為藍色,說明目的載體已經(jīng)成功插入金針菇基因組中并獲得表達。轉(zhuǎn)化效率達16個轉(zhuǎn)化子每10~6個菌絲碎片。有絲分裂穩(wěn)定性分析顯示80%的轉(zhuǎn)化子可以穩(wěn)定遺傳。 

基金：上海市市級農(nóng)口系統(tǒng)青年人才成長計劃項目[滬農(nóng)青字(2017)第1-13號]； 上海市食用菌產(chǎn)業(yè)技術體系建設專項資金[滬農(nóng)科產(chǎn)字(2017)第9號]；

關鍵詞：遺傳轉(zhuǎn)化; 綠色熒光蛋白; GUS組織染色;