【作者】戚元成 李建立 邱立友 申進文 王瑞霞
【機構】河南農業(yè)大學生命科學學院 上海市農業(yè)科學院食用菌研究所農業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室國家食用菌工程技術研究中心上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室
摘要：根據(jù)肺形側耳(Pleurotus pulmonarius)產孢相關基因stpp1,采用反轉錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技術克隆出糙皮側耳(P.ostreatus)產孢相關基因同源物stpo1全長,并對其保守域進行生物信息學分析,使用pEASY-E2原核表達系統(tǒng)進行該基因的原核表達,通過熒光定量PCR分析stpo1表達模式。結果表明:糙皮側耳stpo1全長cDNA序列為2556bp,預測編碼851個氨基酸的蛋白質,具有錯配修復DNA結合域(MUTSd)、ATP結合位點(ABC-ATPase)以及錯配修復域(MutS),屬于錯配修復家族。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)顯示stpo1在原核細胞中具有表達活性,定量PCR顯示stpo1在糙皮側耳不同發(fā)育階段顯現(xiàn)不同的表達水平并且在成熟子實體菌褶中的表達量明顯高于其它部位,表明該基因可能與糙皮側耳的孢子形成有相關性。
基金：國家現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系專項資金(CARS-24)； 河南省高等學校重點科研項目(13B180051)； 河南省高等學校重點科研項目(14A180023)資助；
關鍵詞：糙皮側耳; 產孢相關基因stpo1; RT-PCR; 原核表達; 表達模式;
【機構】河南農業(yè)大學生命科學學院 上海市農業(yè)科學院食用菌研究所農業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室國家食用菌工程技術研究中心上海市農業(yè)遺傳育種重點實驗室
摘要：根據(jù)肺形側耳(Pleurotus pulmonarius)產孢相關基因stpp1,采用反轉錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技術克隆出糙皮側耳(P.ostreatus)產孢相關基因同源物stpo1全長,并對其保守域進行生物信息學分析,使用pEASY-E2原核表達系統(tǒng)進行該基因的原核表達,通過熒光定量PCR分析stpo1表達模式。結果表明:糙皮側耳stpo1全長cDNA序列為2556bp,預測編碼851個氨基酸的蛋白質,具有錯配修復DNA結合域(MUTSd)、ATP結合位點(ABC-ATPase)以及錯配修復域(MutS),屬于錯配修復家族。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)顯示stpo1在原核細胞中具有表達活性,定量PCR顯示stpo1在糙皮側耳不同發(fā)育階段顯現(xiàn)不同的表達水平并且在成熟子實體菌褶中的表達量明顯高于其它部位,表明該基因可能與糙皮側耳的孢子形成有相關性。
基金：國家現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系專項資金(CARS-24)； 河南省高等學校重點科研項目(13B180051)； 河南省高等學校重點科研項目(14A180023)資助；
關鍵詞：糙皮側耳; 產孢相關基因stpo1; RT-PCR; 原核表達; 表達模式;